刘立萍1 ,任艳玲* ,李然1 ,王智民2 ,蒿长英1 ,宋囡 1
(1辽宁中医药大学 基础医学院,辽宁 沈阳 110847; 2辽宁中医药大学 第一临床学院,辽宁 沈阳 110847)
摘要: 目的 探讨JNK信号通路对左归丸(熟地、菟丝子、川牛膝、龟甲胶、鹿角胶、山药、山茱萸、枸杞子)含药血清干预MC3T3成骨细胞分化的影响。方法 制备大鼠含药血清,选用JNK特异抑制剂SP600125,细胞实验分为空白对照组、SP600125组、左归丸组、左归丸加SP600125组、倍美力组、倍美力加SP600125组。孵育48 h后,采用PNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,采用Western blot法分析ALP蛋白表达水平;孵育7 d,采用改良钙钴染色法检测ALP活性;孵育14 d,采用茜素红染色法测定矿化沉积情况。结果 与空白对照组比较,左归丸组显著促进MC3T3成骨细胞分化,明显上调ALP蛋白表达水平(P<0.01);与左归丸组比较,左归丸加SP600125组孵育48 h对ALP活性及蛋白影响不显著,但显著对抗左归丸含药血清对孵育7 d的ALP活性和孵育14 d的矿化结节的促进作用(P<0.01)。结论 左归丸含药血清可能部分通过JNK信号通路干预MC3T3成骨细胞分化,在分化末期尤其依赖JNK通路。
关键词:左归丸;含药血清;MC3T3细胞;碱性磷酸酶活性;矿化沉积;JNK信号通路