复叶耳蕨总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化的影响

梁广胜^1,2，3，殷嫦嫦^1*，殷  明²，邬亚华¹，李辉敏¹，刘玉亮^2,3，魏强强^2,3

（1.九江学院医学部分析检测实验室，江西 九江 332000； 2.南昌大学第二附属医院骨一科, 江西 南昌 330006； 3.南昌大学研究生院医学部，江西 南昌 330006）

摘要：目的 研究复叶耳蕨总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化的影响。方法 采用全骨髓差速贴壁法体外分离、纯化和培养大鼠骨髓间充质干细胞；取P3代细胞，分实验组和对照组，用流式细胞仪测定细胞表面标志物鉴定细胞，采用MTT法检测细胞生长曲线。显微镜下观察两组的细胞形态和组织化学染色的钙化结节;速率法测定碱性磷酸酶（ALP）活性和RT-PCR检测骨髓间充质干细胞诱导分化过程中骨桥蛋白和I型胶原的mRNA表达来鉴定成骨作用。结果 体外培养的细胞表达表面标志；复叶耳蕨总黄酮对骨髓间充质干细胞内ALP活性增高并形成明显钙结节；PCR结果显示复叶耳蕨总黄酮上调骨桥蛋白和I型胶原的mRNA表达。结论 20 μg/mL复叶耳蕨总黄酮可促进大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为成骨样细胞。

关键词：复叶耳蕨总黄酮； 骨髓间充质干细胞； 增殖； 碱性磷酸酶； 成骨分化